Amersham™ ECL™Prime 蛋白印迹试剂

自从1990年进入市场以来，增强化学发光（ECL）蛋白印记系统产品库不断丰富，以适应从常规蛋白检测到采用基于荧光Amersham ECL™plex进行多道分析的各种应用。通过选择ECL检测系统，研究人员不仅可以避开对人有危害的放射性同位素操作，同时还拥有了另外的分析工具，正是由于这种分析具有一次性的特点，使得蛋白分析比以前变得更加快速，更加敏感，也更加地灵活。

Amersham ECL家族最近加入的成员是ECL prime，它至少具有ECL plus两倍的敏感性，其最低检测限（LOD）可达低皮克量级。该试剂的特点在于大幅增加了信号的稳定性，这使得反复曝光变成可能，并使其能在一个试验中轻松地进行多个印记处理。此外，ECL prime所发射的信号强度提高了3到5倍，这也就 意味着ECL prime也采用比ECL plus低3倍的一抗和二抗进行检测，这不仅降低了背景，并使抗体试剂的费用得到降低。

图1. Amersham ECL Prime：GE Healthcare的一种新的、高灵敏化 学发光蛋白印记试剂。

• 信号强度高且灵敏，允许使用高度稀释的一抗和二抗而 不降低灵敏度
• 信号稳定，可重复曝光，非常适合大量实验的开展，客户可以从容地安排实验和检测之间的时间
• 最适合于ImageQuant™LAS 4000（CCD成像）成像，也 可与Amersham Hyperfilm匹配使用
• 可与Rainbow™分子量标准和Amersham ECL Dualvue™蛋 白印记标准配合使用
• 最适合选用Amersham Hybond™-P（PVDF）膜，也可使 用Amersham Hybond-ECL（硝酸纤维）膜

Amersham ECL Prime在蛋白免疫印迹中的应用

ECL Prime主要在蛋白免疫印迹流程的检测阶段发挥作用（图3），同时对上游的步骤也有一定的影响。比如， ECL Prime作为检测方法时可以采用高度稀释的一抗作为与免疫 印迹膜杂交的探针。这不仅在经济上非常合适，也避免了背景信号下淹埋的与目的蛋白之间的较弱特异结合。ECL的高灵敏度要求其不仅能封闭非蛋白结合位点，并且能被清洗步骤彻底清除。‘

图2.ECL prime与偶联在二抗上的HRP之间的反应。HRP可催化ECL prime试剂向感光分子转化，感光分子被氧化产生受激产物，受 激产物衰变时产生光信号。

Amersham™ ECL Prime蛋白印记检测试剂，是20多年来被广泛应用的蛋白印迹标准产品，其被引用文献超过3000篇。ECL Prime试剂通过化学发光法检测蛋白，最低检测限 (LOD）约为1pg，允许使用高度稀释的一抗和二抗而不降低灵敏度。

化学发光蛋白检测
ECL prime可检测出蛋白印记实验中极微量的蛋白质。信号为发射光（化学发光，见图2），其信号强度与检测蛋白量成正比，可以给出单次印记在很宽蛋白水平范围的精确数据。

辣根过氧化物酶（HRP）可催化鲁米诺发生氧化，从而产生425 nm波长的化学发光。与其他化学发光试剂相比，ECL prime在实际中加入了增强剂，可以增加酶活力，从而大幅提高了信号强度和持续时间。通过加入催化剂可以进一步增强发光信号。

Amersham™ ECL Prime试剂好在哪？

配套的Amersham™硝酸纤维膜专应用于Western印迹基质，其不含可导致转膜步骤受污染的任何添加剂。高纯度保证了膜记号的吸水性能和均一的毛细作用性能，以及对蛋白质和多肽的高度亲和力和优异的封闭能力。

作 为世界上第一个在蛋白印迹检测实验中使用的化学发光试剂，Amersham™ ECL品牌自1990年推出以来，一直不断地进行技术改良，为科研工作者提供高品质的检测产品。产品线包括ECL、ECL Prime、ECL Select和ECL Plex四种型号。其中ECL Prime以其高性价比非常适合日常实验频繁的小伙伴们，稳定的性能和中端的价格，让日常实验更加经济有效，实验与检测从容有序运行，才是快乐。

Amersham ECL预制胶，不将就的好性能！

Amersham ECL预制胶稳定性好，可用于分离复杂蛋白样品，实现高质量、可重复的电泳结果：

•无需灌胶，省时方便；

•预制胶保质期长达12个月；

•实验更安全，避免了灌胶时接触丙烯酰胺；

•实验结果更稳定性，预制胶为高质量、可重复的电泳保驾护航；

•在保质期内，预制胶的性能不会随时间的增长而改变。

试剂与耗材，浓度检测、电泳到蛋白纯化，一气呵成！

•核酸样品制备：TriplePrep 试剂盒类产品，1小时内从完整的组织和细胞样品中同时提取基因组DNA，总RNA和变性的总蛋白

•电泳：Amersham ECL预制胶水平蛋白电泳系列产品，以及Immobiline2-D电泳产品。助力您的电泳实验！

•成像：新配方的Hyperfilm 胶片提供可靠的结果和优异的灵活性，符合国际杂志图片标准的图像，使您获得完美的实验最终结果。